CAR-NK细胞疗法,CAR-NK细胞治疗

　　竞争激烈却无人冲线的火热赛道

　　在过去的几年里，细胞免疫疗法已经成为某些类型血液系统恶性肿瘤的一种新的治疗选择。伴随着多款CAR-T疗法步入临床，自体细胞产品的局限性和CAR-T细胞毒性的挑战也随之凸显。人们迫切的需要更方便、安全和有效的新型细胞治疗产品。

　　自然杀伤(NK)细胞是先天免疫系统的一部分，具有独特的优势，包括成为“现货”疗法的潜力。而首次在复发/难治性淋巴恶性肿瘤患者中进行CD19 CAR-NK输注的人体试验证明了这一疗法的安全性，以及具有良好的临床活性。

　　基于这些令人鼓舞的临床反应，研究人员正在积极探索通过延长体内持久性和克服功能衰竭机制，进一步增强CAR-NK细胞效力的方法。除了这些调节CAR-NK细胞内在特性的策略外，还有研究人员致力于将在血液系统恶性肿瘤中的成功转化到实体瘤领域。

　　新视野——将CAR-NK免疫疗法转化至临床

　　2018年，中国大陆的一组研究人员首次报道了CAR工程NK细胞的临床应用。使用第三代CD33导向CAR结构来转导NK-92系衍生的NK细胞，研究人员在1期研究 (NCT02944162)中安全输注剂量高达5×109的CAR-NK细胞进入三名AML患者体内。虽然该疗法被证明是安全的，并且没有任何明显不良事件的证据，但没有患者并未获得持久的缓解。受到辐射的NK-92细胞在体内的持久性有限，在输注后1周内CAR-NK水平下降到检测阈值以下。

　　事实上，CAR工程淋巴细胞的体内扩增和长期持久性构成了细胞治疗的关键。相较于单抗疗法，通过促进持久的临床反应，CAR工程淋巴细胞将具有决定性的优势。然而NK细胞的生理寿命仅有2周，任何一个CAR-NK工程化疗法都需要克服这一生理桎梏，才能实现持续的反应。

　　CAR-NK免疫疗法——无人驶入的蓝海

　　CAR-NK疗法的研究目前处于起步阶段，临床研究的数量逐年增加。此外，在研究的靶标方面，CD19抗原在血液肿瘤中最常见。在实体瘤中进展最为广泛的CAR-NK疗法包括肿瘤相关抗原HER2、MUC1和PMSA等靶点。

　　目前，一些正在进行的临床试验正在调查CAR-NK细胞治疗血液学肿瘤和实体瘤的安全性和有效性

　　▲ 图片来源：参考资料2

　　据不完全统计，在2020年时CAR-NK领域交易额就已高达到47亿美元，其中国外累计发生了6笔交易，金额高达35.33亿美元。国内恒润达生完成了2亿元B+轮融资，据了解这笔资金将会花在CAR-T细胞临床批件和针对实体瘤新靶点的CAR-T、TCR-T、CAR-NK等管线[3]。

　　▲ 图片来源：参考资料3

　　而在过去的几年。CAR-NK免疫疗法的早期临床试验活动正在空前加速，目前有多种CAR修饰的NK细胞产品正在临床研究中。在整个试验领域，研究人员正在使用不同来源的NK细胞和各种模块化CAR设计，对多种目标抗原进行CAR构建。总体而言，呈现两个主要趋势。最明显的是，靶向疾病的范围发生了变化。虽然大多数早期的试验都集中在针对血液系统恶性肿瘤，但最近的许多试验试图探索CAR-NK细胞免疫疗法作为对抗实体瘤的新手段。其次，人们越来越重视通过多重基因编辑方法实现的更复杂的构建体设计，以增强NK细胞的效力和持久性。

　　▲当前评估CAR-NK免疫疗法的1/2期试验概述(图片来源：参考资料1)

　　癌细胞已经进化出复杂的免疫抑制机制，以阻止淋巴细胞浸润的影响，逃避肿瘤的免疫监视。虽然早期的研究主要集中在癌症内在的免疫逃逸机制，但随着研究的深入，研究人员逐步认识到，免疫细胞特异性因子是基本表型重组的基础，它们使免疫细胞处于功能失调状态，无法有效控制肿瘤。

　　寻找一种方法使CAR工程NK细胞更有效，同时不影响其良好的安全性，这对于下一代细胞疗法至关重要。当前的CAR-NK治疗限制围绕三个反复出现的主题：CAR-NK疗法只成功地应用于范围极为狭窄的癌症特异性抗原。其次，有限的体内持久性和最终的免疫细胞衰竭是长期疗效的一大障碍。最后，向肿瘤床的运输受损，以及操纵恶性肿瘤微环境的能力减弱，阻碍了NK细胞与肿瘤细胞的有效相互作用，最终导致肿瘤免疫逃避。

　　扩大CAR-NK在血癌中的治疗范围

　　基于CAR-NK细胞的免疫疗法的大部分初始工作都集中在一组非常有限的靶抗原上，主要是在血液癌领域。而寻找合适的肿瘤抗原来解决B淋巴恶性肿瘤以外的其他癌症，并扩大CAR-NK细胞免疫疗法的治疗范围，也是CAR-NK疗法迫切需要突破的挑战之一。

　　侵袭性T细胞恶性肿瘤

　　侵袭性T细胞恶性肿瘤代表了一个高度未满足的医疗需求领域，临床结果令人沮丧，目前的治疗选择非常有限。事实证明，基于CAR-T的治疗方法具有内在的挑战性，因为CAR-T细胞和转化T淋巴母细胞之间共同表达会带来自相残杀的风险，这种现象会导致注入的CAR-T细胞攻击自身，从而导致治疗失败。另一个令人担忧的原因是自体T细胞产品在制造过程中可能被恶性T细胞污染。CAR-NK细胞缺乏T细胞标志物的表达，同时还具备“现货“疗法潜力，为治疗T细胞恶性肿瘤提供了引人注目的优势。

　　如何减轻T细胞定向CAR修饰的免疫细胞固有的长期T细胞再生障碍的不利影响?其中一种策略是使用双特异性接合剂，恢复非工程NK细胞的细胞毒性潜力，该接合剂可特异性地将NK细胞导向肿瘤细胞并通过其CD16A受体的高亲和力结合介导NK活化。

　　有研究表明，脐带血衍生的NK细胞用细胞因子IL-12、IL-15和IL-18进行预处理，使用四价双特异性CD16A:CD30免疫细胞接合剂AMF13首次成功应用预复合NK细胞诱导针对CD30阳性恶性肿瘤的CAR样反应。采用这种方法，研究人员在体外证明载有AFM13的NK细胞的细胞毒性潜力增加。在携带淋巴瘤的小鼠中进行测试时，AFM13复合NK细胞引起了显着改善的抗肿瘤反应并显着延长了生存期，而没有观察到明显的不良毒性。这种方法目前正在临床中进行测试(NCT04101331)。

　　急性髓性白血病

　　针对AML的工程CAR构建已被证明具有挑战性，有两个重大障碍。白血病母细胞和造血祖细胞的共同抗原表达，如CD123和CD33情况，这增加了靶向脱瘤毒性的潜在威胁，将引起长期多谱系血细胞减少。

　　不同AML人群中的克隆异质性和不同的抗原表达代表了另一个挑战，这使单抗原靶向的治疗方法不能完全抑制疾病，从而导致疾病复发，这一挑战在存在不同的白血病起始克隆的情况下尤为显著。与大量白血病细胞相比，白血病起始克隆具有不一致的抗原特征。

　　而针对CD4(CD28-4-1BB-CD3ζ)的第三代CAR构建体在细胞系衍生的异种移植小鼠模型中被证明可特异性消除原发性CD4阳性AML原始细胞并抑制疾病进展。使用新型定点基因插入CRISPaint技术(CRISPR辅助插入标记)来设计两个第三代CD33导向CAR-NK候选物(CD4-4-1BB-CD3ζ和NKG2D-2B4-CD3ζ)的创新方法已经据报道在体外引起抗白血病活性。

　　Senti Bio的首席科学官Gary Lee博士的研究小组报告了一种巧妙的策略来生成逻辑门控CAR-NK电路以解决两个长期存在的挑战，即异质和共享抗原表达，这些挑战迄今为止阻碍了AML细胞疗法的成功。在预测最佳抗原组合的数据驱动的生物信息学方法的指导下，他们设计了逻辑门控CD33-OR-FLT3-NOT-EMCN CAR-NK细胞。当与FLT3+EMCN-AML原始细胞和健康的FLT3+EMCN+造血祖细胞共培养时，他们的研究同种异体CAR-NK候选物表现出对靶向原始细胞的选择性和差异性杀伤，同时保留了造血干细胞区室。

　　多发性骨髓瘤

　　多发性骨髓瘤细胞表达许多NK激活配体，因此应具有独特的定位，以利用CAR修饰的NK细胞的力量进行靶向治疗。CAR-NK免疫疗法对抗多发性骨髓瘤的报道可以追溯到2014年，其中一组报告了CD138导向CAR构建体用于基因修饰NK-92MI细胞的体外疗效。另一组赋予NK-92细胞以CS1为靶点的CAR受体，延长了异种移植小鼠模型的体内存活时间。

　　然而，由于NK细胞具有共同的CS1和CD38表达，因此研究人员担心NK细胞会导致自相残杀，因此早期利用NK细胞靶向浆细胞疾病的研究受到了限制。独立于NK细胞的内在约束，该领域已经将其注意力转移到探索新的抗原，包括BCMA，这些抗原有可能在先前接触过抗CD38药物的患者中诱导缓解。

　　寻求更强抗癌效力,哪里会是下一个突破口

　　过继细胞免疫疗法已经从实验室应用到临床，预示着血液系统恶性肿瘤治疗的一个新的、有希望的时代。目前已有多款CD19靶向的CAR-T疗法获批，而随着FDA批准靶向BCMA的CAR-T细胞治疗复发/难治性多发性骨髓瘤，过继细胞疗法的治疗范围已经成功扩展到CD19阳性淋巴样恶性肿瘤之外。

　　虽然CAR-T细胞产品为难治性和复发性血液恶性肿瘤患者带来了新希望，但自第一款CAR-T细胞产品获得市场批准以来，近5年的实际临床经验也为该领域的研究人员带来了一些提醒：除了与自体细胞制造相关的繁琐物流和细胞治疗相关毒性的高发生率外，最紧迫的问题仍然是长期疾病控制不理想。正如最初关键性试验的最新结果所显示的那样，当前一代CAR-T产品仍然无法为许多患者提供长期疗效，有相当一部分接受治疗的患者最终复发并死于疾病。

　　近年来，CAR工程化的NK细胞获得了相当大的关注。因为NK细胞的独特的生物学特性使它们对癌症免疫治疗极具吸引力。NK细胞是先天免疫细胞，通过多种作用机制介导针对癌细胞和病毒感染细胞的细胞毒性。

　　传统的理论认为，NK对异常细胞的识别主要是由MHC-I表面表达的缺失驱动，随着时间的推移，人们对激活受体和抑制受体的多种刺激的复杂整合有了更微妙的理解，这些刺激共同决定NK细胞激活状态和目标参与。

　　下一个技术前沿——多重基因编辑

　　合理的构造设计

　　除了将CAR-NK细胞重定向到不同的靶抗原外，最近的研究重点已越来越多地转向基于不同跨膜和细胞内共刺激结构域的模块化组合的优化结构设计，以增强CAR-NK效力。

　　借助当今可用的多功能基因工程能力，研究人员正着手对CAR结构进行微调，以诱导更有效的抗肿瘤反应，增加抗原亲和力或延长体内持久性。目前，研究人员已经探索到多种共刺激元件可产生更有效的抗肿瘤反应，包括来自免疫球蛋白超家族(CD28、ICOS)、TNF受体超家族(4-1BB、CD27、OX40和CD40)的结构域和其他包括CD40L和toll样受体(TLR)。

　　早期的CAR-NK构建体更多的是基于参与T细胞激活的共刺激域，现在人们越来越重视NK特异性信号转接器，其中DAP10、DAP12和2B4发挥着特别重要的作用。这些细胞内信号转接器在与它们各自的上游受体结合后介导NK细胞活化。

　　在一项针对CD19靶向CAR-NK候选药物的临床前研究中，与单独使用CD3ζ信号的构建物相比，加入DAP10(NK激活受体NKG2D的生理适配器)增强了抗肿瘤的效力。类似的观察结果已经被其他研究人员报道，他们通过在前列腺干细胞抗原(PSCA)靶向CAR构建的中加入DAP12，以及间皮质靶向的iPSC衍生的NK细胞中使用2b4增强信号策略。

　　武装CAR

　　前三代CAR对CAR结构设计的修改依赖于生理上存在的免疫细胞受体结构域。被称为“武装CAR”的第四代结构采用了截然不同的方法，通过结合分子有效载荷，从而赋予CAR修饰的免疫细胞具有前所未有的额外特性和功能。这种方法使CAR构建体能够被设计来解决细胞免疫疗法的一些固有生物学限制，从而将CAR工程定位于合成生物学革命的中心。

　　▲ CAR 构造设计的演变(图片来源：参考资料1)

　　可以说，最紧迫的生物约束是在缺乏外源细胞因子支持的情况下，CAR-NK的体内持久性受到限制。虽然细胞因子的临床应用是可行的，但它也有相当大的安全性问题，并可能在无意中刺激免疫抑制的免疫细胞。

　　利用现代双顺反子和多顺反子载体平台，第四代结构可以包含不止一种理想的基因修饰，这种工程方法被称为多重基因工程。

　　CAR-NK免疫检查点的基因破坏

　　尽管采用过继性NK细胞疗法取得了显著成功，但免疫细胞耗竭仍然是尚未解决的挑战。为了突破这一挑战，研究人员需要思考如何提高长期的体内抗肿瘤功效。为了构建下一代CAR-NK疗法，基础NK细胞生物学的基础研究再次成为关注的中心，研究人员在识别NK细胞免疫功能的负调节因子方面进行了大量的工作。

　　使用CRISPR/Cas9介导的基因编辑为调节潜在的免疫细胞生物学开辟了全新的途径。特别是多重基因工程策略允许以定点方式进一步改进CAR修饰的免疫细胞，从而破坏对免疫细胞功能产生负面影响的分子途径。因此已有多个团队开始了设计下一代CAR-NK免疫疗法的征程，这些疗法具有增强的效力、增加体内持久性和对功能衰竭机制的抵抗力，这些研究足以颠覆细胞疗法领域。

　　▲ 构建下一代 CAR-NK 免疫疗法的多重基因工程策略(图片来源：参考资料1)

　　通过破坏CAR-NK功能的负调节以增强抗肿瘤控制，抑制免疫检查点的基因靶向破坏已经成为一个诱人的概念。NK细胞的激活状态受到激活和抑制表面受体的复杂相互作用所控制，而检查点阻断旨在使这种平衡向增强抗肿瘤免疫倾斜。

　　NKG2A是最突出的种系编码的抑制性NK细胞受体之一，其基因缺失与表达其同源配体HLA-E的肿瘤的细胞毒性潜力增加有关。TIGIT是另一个维持平衡免疫反应所必需的抑制检查点，阻断TIGIT也同样被证明可以防止NK细胞耗竭。

　　抵御免疫抑制的肿瘤微环境

　　除了NK细胞的内在免疫检查点外，还有一些由恶性肿瘤微环境引起的外在因素共同为免疫细胞的浸润创造了非常不利的环境。营养缺乏、酸度和缺氧等因素，混合剥夺了浸润效应细胞的抗肿瘤活性。此外，肿瘤细胞已经进化出吸引调节性免疫细胞的机制，例如调节性B细胞和调节性T细胞，以及骨髓源性抑制细胞(MDSCs)、肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)、血小板、成纤维细胞和基质细胞分泌免疫抑制细胞因子(如转化生长因子β1(TGFβ)，腺苷，吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)和前列腺素E2(PGE2))，这进一步消除了残余的有效抗肿瘤反应。

　　腺苷是这些细胞外免疫抑制代谢物之一，通过阻断NK细胞表面A2A腺苷受体(A2AR)的表达，一个研究小组在BRAF突变黑色素瘤的异种移植小鼠模型中使用A2AR缺陷型NK细胞，观察到了增强的肿瘤控制效果。

　　此外，还有研究团队通过使用CRISPR/Cas9编辑对TGFBR2基因进行靶向干扰，成功地使原代人类NK细胞对免疫抑制性转化生长因子β1(TGFβ)具有抗性。在这些观察的基础上，该团队还证明，在胶质母细胞瘤干细胞(GSC)移植的小鼠模型中，使用小分子抑制剂和基因消融对TGFβ受体信号传导的破坏，可以保留NK细胞功能，并阻止GSC诱导的NK细胞抑制表型的形成。

　　这些研究共同强调了如何使用新的基因工程方法，使CAR修饰的免疫细胞对一些最臭名昭著的免疫抑制机制产生抵抗力，以解除恶性肿瘤微环境的干扰，这一研究方向将继续在人类癌症治疗中产生重要影响，尤其是针对实体瘤时。

　　提高CAR-NK细胞活性

　　调节CAR-NK代谢

　　目前，针对免疫代谢途径已成为一个有趣的概念，以使NK细胞更具代谢活力并保持其功能能力。在NK细胞中，IFN-γ的产生依赖于葡萄糖驱动的氧化磷酸化。一旦激活，NK细胞就会发生实质性的代谢变化，从而增加糖酵解和氧化磷酸化(OXPHOS)的速率，以支持产生有效免疫反应所需的能量。

　　雷帕霉素复合物1(mTORC1)在调节NK细胞代谢中起着关键作用，研究表明，CISH信号的破坏产生对CAR-NK细胞的代谢重组，从而保持升高的mTORC1和MYC活性，促进体内持久性和增强抗肿瘤活性。

　　在转录水平上，甾醇调节元件结合蛋白(SREBP)和MYC已被确定为协调代谢适应的两个中央调节元件，使活化的NK细胞能够有效地启动免疫应答。MYC信号通过上调葡萄糖转运蛋白和糖酵解酶的表达以及增加有丝分裂，使代谢机制适应NK细胞的特定需求。NK细胞中维持细胞内MYC蛋白水平的一种机制是通过糖原合成酶激酶3(GSK3)介导的磷酸化以及随后的泛素化和蛋白酶体降解，研究发现，GSK3的抑制可稳定NK细胞中的MYC水平，从而提高其抗肿瘤效力。

　　诱导NK细胞记忆样表型形成

　　NK细胞历来被认为是先天免疫系统。然而，随着细胞因子诱导的记忆样表型的发现，最近的研究对这一范式提出了越来越多的挑战。

　　因为发现了细胞因子诱导的记忆样表型，Todd A. Fehninger和他的团队将这种方法应用于临床，并证明用IL-12、IL-15和 IL-18对分离的NK细胞进行预激活可强烈诱导形成记忆样NK细胞表型，同时还具有增强的针对髓系的效应子功能白血病细胞。基于他们的观察，一项评估白介素预激活NK细胞概念的1期临床试验(NCT01898793)中招募了AML患者，并观察了56%可评估患者的临床反应，其中有四名患者(44%)获得了完全缓解。

　　除此之外，还有研究小组报道了CD19-CAR修饰的记忆样NK细胞成功应用于异种移植淋巴瘤小鼠模型。目前，多个研究团队现在正在调查和分析支撑这种独特的记忆样NK表型的免疫代谢特征。随着越来越多的证据表明线粒体功能障碍与NK细胞免疫反应受损有关，线粒体健康尤其成为关注的焦点，促进线粒体健康以改善NK细胞功能的策略已在研。

　　即将到来的细胞治疗新时代

　　NK细胞，即使经过基因工程改造以表达CAR分子，仍保留其通过其天然受体识别肿瘤细胞的固有能力，从而为它们提供了额外的、独立于CAR重定向杀伤的抗肿瘤反应。值得注意的是，NK 细胞不依赖于T细胞受体 (TCR) 进行细胞毒性杀伤。与T细胞竞争者相比，这赋予了他们更有利的安全性，在同种异体条件下，T细胞竞争者需要进一步进行基因改造以规避移植物抗宿主病 (GvHD)。

　　此外，NK细胞仅分泌少量IFN-γ和GM-CSF，不产生启动CRS的IL-1和IL-6。其次，除了通过单链抗体识别肿瘤表面抗原来抑制癌细胞外，NK细胞还可以通过多种受体识别各种配体来抑制癌细胞，例如自然细胞毒性受体(NKp46、NKp44和NKp30)、NKG2D和DNAM-1(CD226)。最后，NK细胞在临床样本中非常丰富，可以从外周血(PB)、脐带血(UCB)、人类胚胎干细胞(HESC)、诱导多能干细胞(iPSC)甚至NK-92细胞系中产生，而NK 细胞的每种来源都有其独特的优势和挑战。

　　CAR-NK疗法在实体瘤中的挑战尝试

　　CAR-NK疗法的多抗原尝试

　　尽管细胞免疫疗法开辟了治疗血液系统恶性肿瘤的有希望的途径，但这些成果迄今尚未成功转移到实体瘤的治疗中。除了 CAR-NK 免疫疗法的内在挑战(例如有限的体内持久性和功能衰竭)之外，实体瘤对基于细胞的治疗策略构成了一系列独特的挑战，包括其复杂的克隆异质性、与健康组织共享的抗原表达以及固有的敌对免疫抑制微环境。此外，实体瘤已经进化出下调其表面能够活化NK细胞配体的机制，以达到免疫逃避，并且可以有效地削弱免疫细胞向肿瘤床的运输。

　　尽管存在这些挑战，但在针对多种抗原，如：HER2(胶质母细胞瘤;NCT03383978)、PSMA(前列腺癌;NCT03692663)、间皮素(卵巢癌;NCT03692637)、MUC1(晚期实体瘤;NCT02839954)、NKG2D(晚期实体瘤;NCT03415100)和 ROBO1(晚期实体瘤;NCT03940820 和胰腺癌;NCT03941457)的多项目前正在进行的早期研究中，人们越来越关注使用细胞疗法对抗实体瘤。

　　基因工程改善CAR-NK归巢效应

　　为了实现有临床意义的抗肿瘤反应，并使工程细胞疗法广泛用于治疗实体瘤，设计下一代CAR-NK疗法时，需要增强向肿瘤床的迁移以及提高穿透实体肿瘤屏障的能力。几个研究小组目前正在研究NK趋化因子受体的基因修饰，以使NK细胞更有效地归巢到肿瘤部位。

　　在肾细胞癌中，经过修饰以表达超生理水平 CXCR2 的NK细胞表现出向疾病表现部位的运输改善。类似地，在EGFRvIII诱导的CAR-NK细胞上强制表达趋化因子受体4 (CXCR4)可以提高胶质母细胞瘤动物模型的存活率]。已有研究团队在靶向NKG2D配体的CAR中检测了CXCR1的异位表达，并在小鼠腹膜卵巢癌模型中证实了免疫细胞浸润的改善和抗肿瘤功效的增强。

　　许多血液系统恶性肿瘤本质上是单克隆或寡克隆疾病，而实体肿瘤的特征是具有高度异质性的复杂克隆形态。单一抗原定向细胞疗法在对抗由多个共进化克隆驱动的异质肿瘤时面临重大障碍，每个克隆都有其独特的免疫表型和抗原表达模式。用于对抗实体肿瘤的细胞基础治疗还必须解开肿瘤和健康组织之间共享抗原表达的复杂性，以避免无意中误伤和非肿瘤毒性。

　　双或多特异性靶向则成为了新的突破点，这可以减轻实体瘤异质性和共享抗原表达带来的挑战。在设计治疗高难治性疾病(如胶质母细胞瘤)的研究中，NK-92衍生的NK细胞配备了对野生型EGFR和EGFRvIII均具有特异性的双特异性CAR构建体。当注射到两种不同的GBM异种移植模型中时，双靶向 CAR-NK 细胞有效地抑制了肿瘤的生长并提高了生存率，而不依赖于EGRF突变状态 。

　　2021 年初，Jeffrey Miller 的小组介绍了他们在多特异性现成B7-H3靶向 iPSC来源的CAR-NK细胞的部分成果，该细胞可以识别多种实体瘤。B7-H3 (CD276) 是 B7 蛋白超家族的成员，在多种肿瘤中上调，特别是在转移性环境中，并且与预后不良有关 。除此之外，该研究团队还在体外检测到针对卵巢癌、前列腺癌、骨癌和乳腺癌细胞株的强细胞毒性信号。这对作为泛癌抗原具有显著的吸引力。

　　CAR-NK疗法在血癌和实体瘤中双开花

　　CAR-NK细胞疗法治疗实体瘤

　　1、国内首个"现货型"CAR-NK临床试验获药监局批准

　　2021年11月11日，国家药监局药品审评中心通过了一款我国自主研发的针对“晚期上皮性卵巢癌治疗的靶向间皮素(Mesothelin，MSLN)嵌合抗原受体NK细胞(CAR-NK)注射液”(简称：CAR-NK注射液)的临床试验申请。

　　据悉，此款产品是国内首例“现货型”异体来源的CAR-NK产品。这也标志着我国的免疫细胞药物治疗实体瘤的研究迈入了新的里程碑!

　　2、1年生存率翻一倍,CAR-NK疗法在实体瘤中疗效暴增

　　Clinical Cancer Research杂志曾发布一项关于肺癌的2期临床试验报告。热休克蛋白70(Hsp70)在70%左右的中晚期肺癌中高表达，NK细胞在体外先用Hsp70激活，相当于在体外先让NK细胞与未来的敌人先遭遇、先“结仇”，然后回输给病人，让NK细胞在体内正式与癌细胞殊死搏斗——这样一种在体外先用抗原肽刺激、赋予NK细胞一定特异性的作法，是近年来研究的热点。

　　这项临床试验一共入组了16例III期非小细胞肺癌患者，一组接受传统的放化疗综合治疗，一组接受放化疗联合Hsp70预激的NK细胞回输治疗。

　　结果显示：Hsp70预激的NK细胞回输治疗，配合传统的放化疗，可以将1年的生存率从33%翻倍到67%，初步结果振奋人心。

　　CAR-NK细胞疗法治疗血液肿瘤

　　1、有效率73%!CD19 CAR-NK对白血病和淋巴瘤效果显著

　　根据MD安德森癌症中心I / IIa期试验的结果，以CD19为靶点的脐带血来源的CAR-NK细胞疗法，在大多数复发性/难治性非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者和慢性淋巴细胞性白血病(CLL)的患者中显现出临床疗效，而且未观察到重大毒性反应。该试验结果近日发表在New England Journal of Medicine上。在参与该研究的11名患者中，有8名(73%)对治疗有反应，其中7名达到了完全缓解!5名有反应的患者继续接受缓解后治疗。没有患者出现细胞因子释放综合征或神经毒性。这意味着他们在中位随访13.8个月时无疾病迹象。

　　这是一种新型的疗法，首先需要从脐带血库中存储的脐带血中分离出NK细胞，并对它们进行基因工程改造，引入可识别癌细胞表面靶标的CAR。这些CAR NK细胞回输给患者。

　　2、再添利器!iPSC来源的CAR-NK疗法针对淋巴瘤效果颇佳

　　2021年12月13日，在2021年美国血液学会(ASH)年会上，国外研发公司Fate Therapeutics展示了针对复发/难治性B细胞淋巴瘤(BCL)患者的FT596项目1期研究的积极中期数据。

　　ASH上的摘要展示了截至2021年10月11日的临床数据，包含了来自第一、第二和第三单剂量队列(分别为3000万、9000万和3亿细胞)的25名可评估患者(单药组n=12;联合组n=13)，其中24名患者对疗效具有可评估性(单药组n=12;联合组n=12)。这25名患者接受了四种先前治疗线的中位值和两种先前含有CD20靶向治疗的中位值。

　　在这25例患者中，15例患者(60%)患有侵袭性B细胞淋巴瘤，15例患者(60%)对既往治疗无效，8例患者(32%)先前接受过自体CD19 CAR-T细胞治疗。在ASH展示的数据截止日期之后，联合组第三单剂量队列中增加了一名患者对初始抗肿瘤反应具有可评估性，第四单剂量队列(9亿细胞)中有7名患者(单药组n=1;联合组n=6)对于安全性和初始抗肿瘤反应具有可评估性。

　　CAR-NK免疫疗法的时代即将到来

　　尽管最近取得了进展，但关于临床施用 CAR-NK 细胞免疫疗法的基本问题仍然存在。这些包括最佳的患者选择，以及在其他已建立的治疗方案(包括血液系统恶性肿瘤的自体和同种异体干细胞移植)的背景下对 CAR-NK 免疫疗法进行理想的治疗顺序。而如何通过识别预后生物标志物，以及评估CAR-NK治疗的最佳排序，才能更好地为高危患者提供CAR-NK免疫治疗，是未来研究的重中之重。

　　虽然此前报告的首次成功地将基于 CAR-NK 的细胞疗法应用于高危淋巴恶性肿瘤的临床应用代表了癌症免疫疗法领域的一个重要里程碑 ，但它仅标志着未来几年细胞工程创新浪潮的开始。在可预见的未来，以自体和异体干细胞移植为形式的传统非抗原特异性细胞治疗，将继续在高危恶性血液病患者的管理中发挥重要作用。然而随着时间的推移，基于抗原特异性的CAR疗法很可能会发展到更先进的地步。

　　基于 CAR-NK 细胞的同种异体“现货”疗法，由于其在同种异体环境中的广泛适用性和与自体细胞产品相比的巨大成本效益，尤其有望取代长期存在的治疗模式。对于实体瘤，目前正在进行的临床试验的第一份中期报告备受期待，这将为人们对细胞免疫疗法如何快速征服这一高度未满足的医疗需求领域提供更强有力的论证。

　　更令人鼓舞的是，近年来研究活动得到了推动，许多有前途的 CAR-NK 细胞候选产品正在利用高度创新的下一代基因工程方法来应对实体瘤的独特挑战，并有望在短期内推进临床试验。支撑这些发展的基础是在越来越强大的多组学和高维单细胞分析的推动下，人们对基础免疫细胞生物学的不断增长的理解，这在许多方面为一系列创新奠定基础。随着基因工程能力的强大进步，这些见解有望推动进一步的治疗创新，并随着时间的推移从根本上改变长期存在的治疗模式，显著改善临床结果，造福未来几代患者。

　　参考资料：

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　　内容来源:谭祁柏 医麦客