溶瘤病毒治疗,溶瘤病毒疗法联合CAR-T细胞免疫疗法治疗实体瘤成为致胜法宝

　　关键词：CAR-T;溶瘤病毒;实体瘤

　　嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法作为唯一获批的细胞免疫疗法，一直备受关注。在血液肿瘤中，CAR-T疗法表现出堪称奇迹的效果，但对实体瘤的作用一直差强人意。究其原因，除特异性靶点不易锁定外，更主要的原因是，实体瘤形成的免疫抑制环境严重阻碍了免疫细胞进入或靠近肿瘤区域，因此无法对肿瘤组织产生有效的杀伤作用。

　　近日，科学家将两种有效的免疫疗法联合使用，打破肿瘤微环境的抑制，有效暴露肿瘤靶标，助力CAR-T疗法有效打击实体瘤，有望成为CAR-T攻克实体瘤的致胜法宝。

　　1、溶瘤病毒联合CAR-T疗法在多种实体瘤中表现出抗瘤活性

　　该疗法是很多患者比较熟悉的溶瘤病毒疗法，科学家对溶瘤病毒进行了基因改造，使其能进入肿瘤细胞，并在肿瘤细胞表面表达CD19蛋白。然后，科学家能利用靶向CD19的CAR-T细胞识别并攻击这些实体瘤。

　　溶瘤病毒进入癌细胞后，迫使大量CD19在其细胞表面表达(以紫色显示)

　　这一过程很像是科学家为CAR-T疗法专门设计的“卧底”，打入肿瘤内部，不仅打开了攻破实体瘤“堡垒”的大门，还将敌军(肿瘤细胞)一一暴露给免疫细胞(CAR-T)。使得CAR-T细胞长驱直入，直捣黄龙府，将肿瘤组织歼灭于无形。

　　资深研究者，美国纽约市副教授Saul Priceman博士说：“这种组合疗法解决了免疫疗法难以治疗实体瘤的两个主要挑战：一是通过CARs重定向，为T细胞提供有效的实体瘤靶标;二是打破肿瘤微环境的免疫抑制，引导CAR T细胞进入肿瘤，存活并杀死癌细胞。”

　　医学博士Yuman Fong 补充说，“我们设计了这种溶瘤病毒，使其有效进入癌细胞，利用细胞自身的机制自我复制，并对癌细胞进行改造，使其表达出著名的CAR-T细胞靶标CD19的截短形式。”

　　研究人员首先在Fong的实验室中创建了一种溶瘤病毒(OV19t)，以进入肿瘤细胞并开始产生截短的CD19(CD19t)。他们在三阴性乳腺癌细胞系、胰腺癌、前列腺癌、卵巢癌、头颈癌以及脑肿瘤细胞中成功做到了这一点。然后将CD19-CAR T细胞与OV19t体外结合并在小鼠中进行治疗研究。

　　工程痘苗病毒(OVm19t，绿色)散布在用带有CD19的CAR-T细胞处理过的小鼠大肠癌细胞中。

　　图片来源：《科学转化医学》(2020年)

　　研究人员还有一些关键发现。“当我们用病毒感染肿瘤细胞时，我们观察到了第一个可能起作用的信号。CD19t被肿瘤细胞表达的时间比病毒杀死它们的时间要早得多，这为我们提供了一个被CD19-CAR-T细胞靶向的机会，” Priceman实验室的博士后研究员Anthony Park博士说，“两者的结合具有强大的协同作用。”

　　研究人员还表明，已经被该组合疗法治愈的癌症小鼠表现出了延长的保护性抗肿瘤免疫力。

　　Park补充说：“在最初的联合治疗后，免疫系统就建立了对肿瘤的记忆反应，一旦根除肿瘤，小鼠就被免疫保护起来，免受肿瘤复发的影响。”

　　Park说，实体瘤通常在免疫学上是冷的，这意味着它们通常对使用人体自身免疫系统对抗癌症的疗法没有反应。引入病毒逆转了肿瘤恶劣的微环境，使其更易于接受CAR-T细胞疗法。

　　研究人员还表示，“这虽是一个简单的概念，达到今天的状态也经历了很多波折。我们现在正在设计一项临床试验，对患者进行这种组合测试。”

　　该试验将首先测试OV19t在实体瘤患者中的安全性，如果发现这是安全有效的，将进一步验证溶瘤病毒联合CAR-T细胞疗法的效果。该试验预计于2022年开始。

　　2、溶瘤病毒的由来

　　十九世纪末，一名患有白血病的42岁女子在一次疑似感染流感病毒后肿瘤忽然痊愈;1912年，意大利医生报道了一个晚期的宫颈癌患者在注射狂犬病疫苗后病情明显缓解的案例。

　　以上案例让科学家意识到某些病毒能够杀伤肿瘤细胞，于是，“以毒攻毒”的溶瘤病毒疗法进入科学家的研究领域。经过深入研究，科学家不仅发现了天然的溶瘤病毒，还可以通过基因工程改造使某些病毒具备溶瘤活性。

　　于是，经过一百多年的发展，溶瘤病毒成为一种重要的免疫疗法参与到肿瘤的治疗过程。而被应用的病毒类型也由野生型转向以人工基因改造为主。目前溶瘤病毒已经发展至第三代，

　　包括疱疹病毒、肠道病毒、牛痘病毒在内的十多种病毒被开发成溶瘤病毒药物并进入临床试验。众多国内外药企都竞相开展溶瘤病毒肿瘤免疫疗法研究，并积极探索溶瘤病毒肿瘤免疫组合疗法的应用潜能。

　　3、国内外先后获批,溶瘤病毒前景广阔

　　随着溶瘤病毒的抗癌作用逐渐凸显，全球各大药企纷纷投入溶瘤病毒的研究热潮。迄今为止共有两款溶瘤病毒制剂获批上市。

　　2005年，俞德超博士发明的世界首个上市的溶瘤病毒类药物——安柯瑞H101(重组人5型腺病毒注射液)在我国获批用于治疗原发灶、临床晚期、复发的头颈部肿瘤，对治疗晚期鼻咽癌、膀胱癌等表现出非常好的疗效，但由于当时研发资金不足开始沉寂。

　　2015年，美国制药厂商安进Amgen生产的皮肤癌治疗产品Imlygic获批上市。美国食品药品监督管理局(FDA)欧盟和澳大利亚相继批准了T-Vec(Imlygic)用于首次手术后复发的黑色素瘤患，标志着溶瘤病毒技术基本成熟。

　　近期，溶瘤病毒联合用药的临床试验频传喜讯，各大制药公司也在通过合作/并购等方式积极布局溶瘤病毒药物。登录全球肿瘤医生网可了解更多临床试验招募情况或进行资料评估。

　　随着更有效的溶瘤病毒的上市以及适应症的拓展，溶瘤病毒的市场规模有望迎来爆发式增长。

　　近年来，国内溶瘤病毒行业也趋于繁荣，近10家国内公司自主研发的溶瘤病毒项目开展了临床试验，在研溶瘤病毒超过200种，大多数都是针对实体瘤的研究。其中，国内某知名癌症中心主导的重组溶瘤痘苗病毒注射液T601单药及结合前药5-FC治疗晚期恶性实体瘤的 Ⅰ/Ⅱa期临床试验正在招募患者，有相关适应症的病友可申请参加，现将部分入组标准总结如下。

　　入选标准：

　　年龄18~75(含)周岁，性别不限;

　　组织学或细胞学确认的，前期经过规范治疗后无标准治疗手段的晚期恶性实体肿瘤患者;

　　ECOG体力评分0-1分;

　　预计生存时间3个月以上;

　　根据RECISTv1.1，至少有一个可评估的肿瘤病灶;

　　有足够的血液系统功能、肝功能及肾功能：a)ANC≥1.5×109/L，PLT≥80×109/L，Hb≥90g/L;b)TBIL≤1.5×ULN，ALT≤3×ULN，AST≤3×ULN(肝转移或肝癌患者ALT≤5×ULN，AST≤5×ULN);c)Cr≤1.5×ULN，且肌酐清除率>50mL/min(根据Cockcroft-Gault公式计算);d)APTT≤1.5×ULN，PT≤1.5×ULN，INR≤1.5×ULN;

　　有生育能力的合格患者(男性和女性)必须同意在试验期间和末次用药后至少12周内使用可靠的避孕方法(激素或屏障法或禁欲);育龄期的女性患者在入选前7天内的血妊娠试验必须为阴性;

　　受试者须在试验前对本研究知情同意，并自愿签署书面的知情同意书;

　　详细入排标准可咨询全球肿瘤医生网医学部。

　　我们期待，随着技术的不断进展，溶瘤病毒疗法能够真正突破肿瘤微环境的屏障，为CAR-T疗法在内的肿瘤免疫疗法攻克实体瘤打开一条“生路”。

　　参考资料

　　1.https://medicalxpress.com/news/2020-09-scientists-powerful-immunotherapies-eradicate-solid.html

　　2. https://www.yidianzixun.com/article/0QOUnJwB