肿瘤生物细胞治疗,细胞生物治疗肿瘤

　　一、什么是细胞生物治疗

　　随着这种“双细胞生物疗法”的发展，国内的生物免疫治疗技术趋于成熟，一种更加先进的细胞生物免疫疗法应运而生，这种疗法就是“多细胞生物疗法”，顾名思义，这种疗法与“双细胞生物疗法”相比，增加了抽取及回输给患者的免疫细胞的类型，即在DC细胞、CIK细胞的基础上，又增加了NK细胞、CD3AK细胞、γδT细胞。

　　DC细胞的作用是识别并诱导免疫活性细胞杀伤肿瘤细胞;CIK细胞的作用是对标记的癌细胞进行广泛杀伤;NK细胞能够杀伤肿瘤干细胞，避免转移复发;γδT细胞能够杀伤肿瘤干细胞，辅助DC细胞识别肿瘤细胞;CD3AK细胞针对肝癌等病毒癌细胞具有超强杀伤力。五种细胞联合，让生物免疫疗法更加具有针对性，对癌细胞的杀灭更加全面和彻底，杀瘤效果更加显著。

　　多细胞免疫治疗相当于“灵巧炸弹”[1]，对特定的肿瘤患者，采用量身定做的细胞免疫治疗方案，在杀伤肿瘤方面具有细胞活性更大、靶向性更强的优势。多细胞免疫治疗具有以下的治疗特点：首先治疗是全身性的，提高患者全身的免疫功能，而不是局部的某一部分;其次杀瘤普广，能有效彻底清除体内的肿瘤细胞，这样就防止了患者复发、转移的后发现象;再次治疗无损伤，不杀伤正常细胞，不损害人体免疫功能，不损害脏腑器官。

　　【DC细胞】

　　DC细胞就是树突状细胞(Dendritic Cells)，是目前已知体内递呈功能最强的抗原提呈细胞，经体外大量扩增培养、肿瘤抗原致敏后，回输给患者，可促使患者T细胞增殖分化为细胞毒性T细胞、同时激活B淋巴细胞，全面启动抗体免疫系统产生高效而特异的抗肿瘤效应，但由于体内DC含量少，难以满足临床应用的需要，因此获得大量成熟的DC是临床应用的基础。

　　CIK细胞细胞因子诱导的杀伤性细胞(cytokine activated killer cells，CIK)是一种有效的杀伤免疫活性细胞，在体外条件下，人外周血单个核细(PBMC)经多种细胞因子共同刺激后诱导成为一群异质细胞，具有增殖速度快，杀瘤活性高，且对正常骨髓造血毒性小等优势。

　　研究认为CIK细胞对肿瘤的杀伤作用是以下三条机制实现的：1通过释放颗粒酶、穿孔素裂解靶细胞，这是CIK细胞杀伤靶肿瘤细胞的主要机制;2体内活化的CIK细胞可分泌多种细胞因子如干扰素γ、肿瘤坏死因子和白介素2等，不仅对肿瘤细胞有直接抑制杀伤作用，而且还可通过调节免疫系统间接杀伤瘤细胞;3 CIK细胞表达FasL(Ⅱ型跨膜糖蛋白)通过与肿瘤细胞膜表达的Fas(Ⅰ型跨膜糖蛋白)结合，诱导肿瘤细胞凋亡。

　　【NK细胞】

　　NK细胞即自然杀伤细胞，它是人体防御体系的第一道屏障。它通常处于休眠状态，一旦被激活，它们会渗透到大多数组织中攻击肿瘤细胞和病毒感染细胞。NK细胞是人体先天免疫的核心组成部分，是肿瘤细胞免疫的基础。

　　由于NK细胞的杀伤活性无MHC限制，不依赖抗体，因此称为自然杀伤活性。NK细胞作用于癌细胞后杀伤效果出现早，在体外1小时、体内4小时即可见到杀伤效应。同时NK细胞弥补了细胞毒性T淋巴细胞在杀伤肿瘤细胞时必须识别MHC-I类分子，而无法杀伤此类分子阴性的肿瘤细胞的缺陷。

　　NK细胞的特点

　　①、NK 细胞是人体内抗癌活性最强的细胞，可直接识别、杀死癌细胞，抑制肿瘤的生长及扩散;

　　②、NK 细胞会通过其分泌的因子抑制肿瘤附近新血管的增生，限制肿瘤生长;

　　③、NK 细胞可直接改善并调节患者的免疫力及神经系统，间接提高患者之生活品质;

　　④、NK 细胞会分泌多种细胞因子，减少患者疼痛，间接提升生活品质;

　　⑤、NK 细胞治疗无副作用。

　　【γδT细胞】

　　γδT细胞是介于特异性免疫与非特异性免疫之间的一种特殊类型的免疫细胞，主要分布于皮肤和黏膜组织，一般不超过T细胞总数的5%，γδT细胞处于机体免疫防护系统的第一线，在抗肿瘤免疫中具有重要的作用，具有细胞毒性和分泌多种细胞因子及趋化因子的功能。

　　γδT细胞特点

　　①、γδT细胞能够与多种免疫细胞发生作用，参加抗肿瘤免疫应答。

　　②、γδT细胞能够在肿瘤发生的早期阶段迅速引起有效的抗肿瘤免疫应答

　　③、γδT细胞在抗肿瘤免疫过程中具有重要的保护作用。

　　④、γδT能够利用细胞毒效应杀伤肿瘤细胞，防止肿瘤的发生发展

　　⑤、γδT细胞能够分泌相关因子使活化的淋巴细胞、抗原递呈细胞、中性粒细胞募集到特定位置，产生效应，其诱导产生的趋化因子能够放大肿瘤信号。

　　⑥、能分泌穿孔素，诱导肿瘤细胞凋亡

　　由于γδT细胞具有独特的抗原识别特性和组织分布，使其成为最合适的早期抗肿瘤效应细胞之一，与其他天然免疫细胞构成机体防御恶变的第一道屏障，在抗肿瘤免疫监

　　视和免疫效应中发挥着重要的作用。

　　【CD3AK】

　　CD3AK是抗CD3单克隆抗体和IL-2共同激活的杀伤细胞，具有扩增能力强、体外存活时间较长、细胞毒活性高、分泌淋巴因子能力强和体内外抗肿瘤效果显著等优点。CD3AK具有广谱的非MHC限制的杀伤肿瘤细胞的作用，能够有选择地直接或间接杀伤肿瘤细胞，对正常组织细胞没有杀伤活性，对人体没有毒副作用。

　　提取：无菌条件下抽取患者40—50ml血液;

　　分离、纯化：利用贴壁筛选法,密度梯度离心法,流式细胞法分离,纯化细胞;

　　培养：在特异抗原作用及无菌条件下培养;

　　扩增：待细胞融合会传代后，将其冲洗，消化后按比例继续培养扩增;

　　回输：培养成功后通过腰穿,动脉介入等方法植入患者体内;

　　术后监护：自体植入后8小时—2天内监护体温、血压、呼吸等生命体征

　　二、细胞生物治疗特点

　　1.手术+多细胞治疗 预防转移复发

　　提高患者术前抵抗力，快速恢复手术造成的免疫损伤，清除术后残留的肿瘤细胞及微小病灶，防止转移与复发。

　　2.化疗+多细胞治疗 提高化疗敏感性

　　增加化疗敏感性，降低化疗药物的副作用及免疫抑制作用，增强耐药性和免疫力，清除未杀伤的休眠期肿瘤细胞。

　　3.放疗+多细胞治疗 降低毒副作用

　　放疗加上CLS-mct多细胞免疫治疗增强放疗的敏感性，提高放疗耐受性,减少放疗的毒副作用，对患者来说更为安全。

　　4.单独多细胞治疗 实现带瘤生存

　　采用患者自身的免疫细胞杀伤肿瘤细胞，没有副作用对人体不产生任何伤害，能有效地长患者生存时间，提高患者生存质量。

　　三、细胞生物治疗技术的发展历程

　　1992年，美国FDA正式通过将生物免疫疗法视为癌症基本疗法之一的议题，在美国临床得到广泛应用。

　　2000年，美国Yamazaki 博士等人在《柳叶刀》杂志报道了生物免疫疗法能够有效预防肿瘤的转移和复发。

　　2009年3月，中国卫生部颁布的《医疗技术临床应用管理办法》中，将“自体免疫细胞治疗技术”纳入第三类技术进行管理，同时通过审批的医疗机构可开展临床应用。

　　2011年4月，CCTV《新闻联播》对CLS生物免疫治疗技术进行了报道，指出生物免疫疗法治疗肿瘤取得重点突破，早期癌症三分之一可治愈。

　　2011年10月，法国科学家拉尔夫·斯坦曼因“发现树突状细胞和其在后天免疫中的作用”获得诺贝尔医学奖，标志着生物免疫治疗成为癌症治疗的新型疗法。

　　2012年3月6日，中国卫生部正式将生物免疫治疗癌症纳入技术管理办法中。

　　2012年4月15日，中国政府正式将治疗技术生物细胞免疫入医保。

　　文章来源:中广微生物 微生物技术应用